液相色譜系統(tǒng)大多使用液體自動(dòng)進(jìn)樣器引入樣品,正確使用自動(dòng)進(jìn)樣器是液相色譜系統(tǒng)分離度的基本條件,用自動(dòng)進(jìn)樣器注入適當(dāng)體積的標(biāo)準(zhǔn)樣品可為峰高和峰面積的測(cè)量提供小于1%的標(biāo)準(zhǔn)偏差。對(duì)于液相色譜而言,無論是手動(dòng)進(jìn)樣器或是自動(dòng)進(jìn)樣器都是用六通閥進(jìn)樣的,只是自動(dòng)進(jìn)樣的較手動(dòng)進(jìn)樣器的死體積較大,多了計(jì)量泵和一部分聯(lián)接管線。
1.基線不穩(wěn),鬼峰增多
現(xiàn)象:Fig1a和Fig1b分析的是同一標(biāo)準(zhǔn)品。Fig1a基線不穩(wěn),鬼峰增多;而Fig1b基線穩(wěn)定,為正常圖譜。
Fig1a是基線不穩(wěn),鬼峰增多的圖譜
Fig1b是正常的圖譜,同時(shí)是清洗干凈后的圖譜
原因:在排除了泵,流動(dòng)相和檢測(cè)器問題后,這種現(xiàn)象說明進(jìn)樣系統(tǒng)被污染了。
解決方法:用5%的高氯酸水溶液代替原來的自動(dòng)進(jìn)樣器的清洗液,用針筒抽吸約100mL,在樣品瓶中裝入上述清洗液,用一根塑料阻尼管代替色譜柱,阻尼管出口處連廢液,不接檢測(cè)器。打開泵,設(shè)置一個(gè)常規(guī)流速。設(shè)置自動(dòng)進(jìn)樣程序,進(jìn)樣量200μL,分析時(shí)間1分鐘,連續(xù)20次。結(jié)束后把清洗液換成純水,樣品瓶中裝純水,依上述同樣操作,(考慮到進(jìn)樣量較多,且重復(fù)次數(shù)多,準(zhǔn)備5個(gè)裝適量液體的樣品瓶,放入樣品盤中,設(shè)置自動(dòng)進(jìn)樣程序,每個(gè)瓶連續(xù)抽4次,5個(gè)樣品瓶合計(jì)抽20次,避免吸空)。
說明:5%的高氯酸水溶液能夠有效地去除系統(tǒng)中的污垢,如若無高氯酸,可用甲醇,純水大進(jìn)樣量多次清洗,也能起到同樣的效果。
2.泵壓力突然降至0或很小
現(xiàn)象:在一次連續(xù)分析樣品過程中,開始分析時(shí)系統(tǒng)很正常,但是到分析第八個(gè)樣品時(shí)突然發(fā)現(xiàn)泵壓降至0.3Mpa,而正常時(shí)泵壓為5.5Mpa。聞到進(jìn)樣器中有甲醇味(流動(dòng)相中甲醇含量很大)。打開進(jìn)樣器門,發(fā)現(xiàn)排液閥下面的管子有液體滴出,帶有甲醇味,停止系統(tǒng),按shift+9發(fā)現(xiàn)進(jìn)樣口和rinse口鹽析很厲害。
原因:進(jìn)樣口被堵,流動(dòng)相無法進(jìn)入色譜柱,滲漏出來,致使泵壓下降。
解決方法:根據(jù)自動(dòng)進(jìn)樣器常規(guī)維護(hù)
3.和4.操作,更換進(jìn)樣隔墊和Septumcutout(若沒有備件,進(jìn)樣口密封圈和rinse口隔墊用純水→甲醇超洗干凈。)用擦鏡紙沾純水擦干凈進(jìn)樣口和rinse口旁的鹽析,再用甲醇擦洗。裝上兩個(gè)部件,打開機(jī)器調(diào)試,無滲漏,泵壓正常即可。